Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1改型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失胰岛自身HIV到消失1改型乳癌临床病因的困难重重领军在幼儿时期就有很好的描述，多个胰岛自身HIV感染性的幼儿中都有70%在小鼠转化后10年内患上乳癌，而随访15年的幼儿这一%增大到84%。来得之下，占临床1改型乳癌一半以上的改型1改型乳癌的复发机制还不会取得充分的深入研究。

更多的人开始应用于分期子系统来判别1改型乳癌的困难重重：有机本体在消失多种胰岛自身HIV时转到第1期中，消失血压异常时转到第2期中，消失病因时转到第3期中。一些多发胰岛自身HIV感染性的有机本体，在1期和2期，困难重重较慢，并演进为复发的1改型乳癌。我们之前描述了一小组在首次探测到多种胰岛自身HIV样品后最不及10年无乳癌的极慢困难重重者，这小组高血压人数不及，但基本特征非常说明。随后，我们发现胰岛自身复合物特异性CD8+T蛋白自由基在困难重重较快的高血压中都基本不发挥作用，但在近期复发和一直发挥作用的乳癌高血压中都很易于探测到。这可能表明，与困难重重高血压来得，这些高血压神经性自由基的调控增强。

一时期深入研究表明，尽管调控性T蛋白(Treg)数量短时间，但乳癌高血压发挥作用一些功用原因，其中都除此以外对IL-2的自由基灵活性减缓。此外，乳癌高血压中都的物理现象CD4+T蛋白可能对调控更具抵抗性，平庸为物理现象T蛋白的诱导减慢，人为激发的Treg和本体外激发的诱导Treg，以及复合物亲身经历的CD4+T蛋白中都IL-2自由基减慢。本深入研究的目的是描述了CD4+调控性T蛋白(Treg)在在在极较快困难重重者中都的基本特征，他们的平均成年为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX深入研究是一项以人群相结合的纵向深入研究，在21岁以下住院的高血压亲属中都检查1改型乳癌的危险因素。我们之前描述了一直较快困难重重者的基本特征，他们保持多重胰岛自身HIV感染性超过10年，但不会消失乳癌的临床病因，慢性或非完成性神经性。随后，10名暂时保持无乳癌并愿意共享大量体内样品的较快困难重重者归属于T和B蛋白功用深入研究。在目前为止的深入研究中都，8名慢困难重重者(SP小组)，中都位成年43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的胰岛自身HIV感染性。所有的与会者都保持稳定1改型乳癌困难重重的1期，尽管一些人随后失去了胰岛自身HIV对某些复合物的感染性自由基，然而，一名高血压已经保持稳定2期最不及6年，但不会消失临床病因，一名高血压被诊疗为乳癌，该受试者72岁，在采自实验样品时，其HbA1c下降到53 mmol/mol(7%)，在数据深入研究中都对该供本体完成了直接审计。转化外周血单个核蛋白(PBMCs)，采用多参数流式蛋白妖术和T蛋白诱导试验审计供本体中都Treg的频领军、表改型和功用。应用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、总括和重生)完成无监理聚类深入研究，审计Treg表改型。

结果：与卫生供本体来得，来自慢困难重重本体的失忆CD4+T蛋白的监理聚类揭示，激能活的失忆CD4+ Treg频领军增大，与阿托品诱导的TNFR就其蛋白(GITR)表达出来增大有关。一名HbA1c下降的高血压与困难重重较快者和匹配的对照小组来得，Treg谱有所不同。功用深入研究表明，与卫生供本体来得，来自较快困难重重本体的Treg介导的CD4+物理现象T蛋白诱导明显受损。平庸为对物理现象CD4+T蛋白CD25和CD134表达出来的诱导增大。

上图1 深入的表改型深入研究揭示，CD4+Treg亚改型在慢困难重重链表中都增大。由FlowSOM生成的Treg房，聚集在来自所有供本体的能活CD4+CD45RA -蛋白上。根据标有物表达出来鉴定出10个元簇:失忆T蛋白_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;失忆T cell_4;CD49b失忆T蛋白;HLA-DR + GITR +失忆T蛋白;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)应用于9个不同Treg标有生成的10个元簇的MST。每个链表均是由一个炮兵部队(100个炮兵部队)，更大的元炮兵部队(10个元炮兵部队)在链表小组四周上色。每个链表中都的粥上图坚称单个标有的表达出来级别。(b)每个元聚类的热上图，以揭示整本体标有表达出来。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)生成上图，以及FlowSOM鉴别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较丰度为每个metacluster木箱直通上图(丰度> 0.05%)确定为HD和SP小组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +失忆T蛋白(h)、失忆T cell_1(i),失忆T cell_2 (j),失忆T cell_3 (k) n d CD49b失忆T蛋白(l)。深蓝色橘色均是由人口为120人SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对大写秩探测。此键适用于上图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

上图2 应用于CITRUS的预测模改型证实，Treg频领军的增大是困难重重较快的徽章。标准介导(a - f)和大豆深入研究(g-k)相较SP与会者和匹配的HD与会者在CD4+CD45RA−T蛋白上的差异。(a)杂交CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群本体的均是由性上图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表达出来完成转化，建模FlowSOM群本体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)小组以及供本体SP 606(深蓝色)中都CD25+ cd127的频领军汇总上图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+介导子集的木箱直通上图;(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)柑桔簇双螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表达出来低压制做，上标突出的簇被鉴别为SP和HD链表间的不同。(j)木箱直通上图揭示了在SP(蓝点)和HD(灰点)小组中都，CITRUS失忆Treg_3和Treg_4的相较丰度(%)。(k)直方上图揭示每个簇的表改型(粉红色)和Treg标有相较表达出来与或多或少表达出来(金色);上列，磁盘Treg_3;下面一路上，磁盘Treg_4。或多或少与所有其他簇中都标有的表达出来有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对大写秩探测

上图3 与卫生献血者来得，困难重重较快者失忆treg的GITR增大。每个失忆CD4+T蛋白元簇(失忆T蛋白_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;CD49b +失忆T蛋白;HLA-DR + GITR +失忆T蛋白;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个表达出来标有的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)链表的表达出来热上图(sp606不除此以外在内)。(c,d)失忆Treg_4元簇中都所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(深蓝色)的FlowSOM GITR表达出来串联，揭示直方上图(c)和汇总上图(d)。Wilcoxon配对大写秩和探测，p< 0.07(深蓝色)所有供本体除此以外，p< 0.05(金色)供本体SP 606和匹配的HD不除此以外在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR表达出来，从标准介导，从所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(深蓝色)串联，揭示直方上图(e)和汇总上图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对大写秩探测

上图4 来自较快困难重重的CD4+ treg蛋白控制物理现象CD4+T蛋白的灵活性减缓。SP小组用金色的直通和橘色坚称，HD小组用黑色的直通和橘色坚称，深蓝色的直通/橘色坚称供本体sp606。应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白完成分选。CD4+CD25−(应答者)被标有为CFSE, Treg按观察的%校准。用抗CD3 /28微珠重置蛋白，培养3天内完成流式蛋白妖术探测。(a-d)与CD4+应答者相较应的treg培养(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应答者培养。(a,b,f) CFSE抑制(a,e)和CFSE诱导平均值(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱导平均值。应用于感染性对照(激能活的响应蛋白不含treg)数值诱导平均值。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相较测试

上图5 物理现象CD4+T蛋白对较快困难重重的T蛋白重置的诱导更敏感。SP小组用金色的直通和橘色坚称，HD小组用黑色的直通和橘色坚称，深蓝色的直通/橘色坚称供本体sp606。应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白完成分选。CD4+CD25−(应答者)被cfsel标有，treg按观察的%校准。用抗CD3 /28微珠重置蛋白，培养3天内完成流式蛋白妖术(CD25反染)和蛋白因子深入研究。HD Treg与HD、SP或sp606应答者一同培养。(a,b) CFSE抑制(a)和CFSE诱导百分领军(b)。(c,d) CD25诱导百分领军(c)和CD134诱导百分领军(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在深入研究生院中都的表达出来。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相较测试

得出结论：我们得出的得出结论是，来自较快困难重重子的重置失忆CD4+Treg在GITR表达出来中都取得了扩大和独特，强调了进一步深入研究Treg在1改型乳癌风险有机本体中都的异质性的实质。

标题典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28